产品货号：
BTN80102
中文名称：
柱式粪便DNA提取试剂盒
英文名称：
Stool DNA column extraction kit
产品规格：
50T
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
本试剂盒专门用于从各种动物粪便中快速提取高质量的DNA。
保存：室温，有效期1年。
氯仿
相关搜索：柱式粪便DNA提取试剂盒，粪便DNA提取，Stool DNA column extraction kit
- 操作简单快速，一个样品只需要十多分钟的时间。
- DNA更加纯净，OD260/280一般都在1.8以上，得到的DNA样品原液或稀释液可以直接用于PCR扩增。
- 每次微量提取可以处理100～300mg左右的样品，能得到5μg左右DNA，片段长度在25kb左右。
- 可以同时提取到肠道上皮细胞和可能的肠道病原菌的DNA。
| 组分 | 规格 |
| 粪便DNA纯化溶液A | 25mL |
| 粪便DNA纯化溶液B | 25mL |
| 粪便DNA纯化溶液C | 40mL |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50mL |
| DNA洗脱液 | 10mL |
保存：室温，有效期1年。
氯仿
- 65℃预热粪便DNA纯化溶液A，待其沉淀溶化后充分混匀，取0.5mL加入到1.5mL塑料离心管中并放置于65℃待用。
- 称取0.1～0.3g的粪便，加入到含预热的粪便DNA纯化溶液A的离心管中，震荡器上剧烈震荡5～10分钟。如果是扩量操作，可以使用更多粪便和较大离心管。也可以将同一种粪便在较大离心管中震荡处理，然后再分到1.5mL离心管中。
- 不论使用大的还是小的离心管，一定要让管底的粪便震荡起来。
- 将离心管置于65℃水浴中保温至少5分钟。
- 14000g室温离心3分钟，将上清转移到一新离心管中。
- 上清液一般呈淡黄色或深棕色，实际颜色随样品而异，上清液的体积一般为300～400μL。
- 在上清液中加入等体积的粪便DNA纯化溶液B，上下颠倒30秒充分混匀，溶液将呈白色或淡黄色混浊状。
- 将离心管冰浴至少5分钟。
- 14000g室温离心3分钟，转移上清到新的1.5mL离心管中，上清液颜色将比第4步得到的上清的颜色稍淡，体积在0.7mL左右。
- 下面第8和第9步的氯仿抽提操作可以省略，直接进入第10步，但DNA的产量会低50%左右，OD260/280在1.7～1.8。如果直接进入第10步，则转移的溶液体积不要超过0.6mL，否则没有空间加粪便DNA纯化溶液C。
- 加入0.2mL的氯仿(自备)，震荡器上充分振荡30秒混匀。
- 一定要让管底的溶液震荡起来。
- 14000g室温离心3分钟，小心转移上清到新离心管中。
- 离心后两相交界面将有白色膜状物，其中有机相部分颜色较深，一般呈淡棕色。将0.5mL上清转移到新的1.5mL离心管中。如果有多余的可以弃之不用。
- 加入0.8mL的粪便DNA纯化溶液C，上下颠倒30秒混匀。
- 分两次上柱，即先转移一半的混合液到离心吸附柱中，14000g室温离心半分钟，弃穿透液，然后再将剩下的混合液到离心吸附柱中，14000g室温离心半分钟，弃穿透液。
- 加0.7mL通用洗柱液到离心吸附柱中，14000g室温离心半分钟，弃穿透液。
- 再加0.3mL通用洗柱液到离心吸附柱中，14000g室温离心半分钟，弃穿透液。增加一步洗涤能使最后得到的DNA的纯度稍有提高，但产量稍微有所降低。
- 14000g室温再离心半分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会污染DNA。
- 将离心吸附柱转移到一新的1.5mL塑料离心管中，加入100μL DNA洗脱液。
- 室温放置离心吸附柱1～2分钟。
- 14000g室温离心半分钟，离心管中溶液即为DNA样品，可以立即使用或存放于冰箱待用。
相关搜索：柱式粪便DNA提取试剂盒，粪便DNA提取，Stool DNA column extraction kit